Précision et rapidité : des essais moléculaires pour accroître la sécurité des thérapies cellulaires

La rapidité et la précision des essais moléculaires sont devenues essentielles pour assurer la sécurité et la conformité des produits de thérapie cellulaire et génique. Chez C3i, ces essais sont développés pour fournir des données validées, fiables et rapidement exploitables, tant pour les autorités réglementaires que pour les cliniciens.

L’essai mycoplasme en est un excellent exemple. Alors que les méthodes compendiales classiques exigent une période de culture de 28 jours, l’essai de PCR en temps réel du Centre C3i permet d’obtenir une sensibilité et une spécificité équivalentes en une seule journée. Réalisée sur la plateforme QuantStudio 5, cette méthode détecte plus de 200 espèces de mycoplasmes grâce à la technologie TaqMan et à l’analyse des valeurs de Ct. Le flux de travail a été spécifiquement adapté aux produits de thérapie cellulaire, garantissant la conformité aux exigences des lignes directrices USP 63 et EP 2.6.7. Une innovation qui accélère concrètement l’accès des patients à leurs traitements.

Les essais de sécurité comprennent également la quantification du nombre de copies vectorielles (VCN). Comme l’intégration de vecteurs viraux dans l’ADN cellulaire peut présenter un risque oncogénique lorsqu’elle est excessive, la précision de la mesure est primordiale. L’essai qPCR de C3i cible à la fois la séquence vectorielle et un gène de ménage. Une version par PCR digitale, actuellement en développement, permettra une quantification absolue sans courbe d’étalonnage, améliorant encore la robustesse analytique.

C3i réalise également des essais de détection de virus compétents pour la réplication (RCR, RCL), afin de confirmer l’absence d’événements de recombinaison indésirable durant la fabrication. Ces essais qPCR ciblent les gènes viraux pertinents et reposent sur des critères stricts de conformité analytique, garantissant que chaque lot de produit thérapeutique est exempt de contaminants susceptibles de compromettre la réplication avant sa libération.

Pour les thérapies modifiées par édition génomique, le séquençage offre une couche supplémentaire d’assurance. Le séquençage Sanger, réalisé sur la plateforme SeqStudio, permet de confirmer la précision et l’efficacité de l’édition. Parallèlement, le séquençage de nouvelle génération (NGS) réalisé sur les systèmes Ion Chef et S5 permet d’analyser en profondeur les récepteurs TCR bêta et de suivre la reconstitution immunitaire du patient au fil du temps.

Un principe commun guide l’ensemble de ces méthodes au sein du Centre C3i : l’intégrité des données. Toutes les plateformes respectent les exigences de conformité électronique de la norme 21 CFR Part 11, y compris les registres d’audit et les signatures sécurisées. Le résultat est une chaîne d’essais moléculaires rapide, fiable et parfaitement alignée sur les attentes réglementaires, qui transforme des analyses complexes en données claires, validées et prêtes pour l’inspection.

Cet article est tiré et traduit du contenu présenté lors du webinaire « Cellular Therapy Product Release Testing within a GMP context », présenté le 16 octobre 2025 par les experts du C3i : Ann Brasey (Chercheuse principale), Pauline Cassart (Superviseure technique QC) et Ludovic Durrieu (Gestionnaire des opérations QC).